PCR試劑盒通常有3次加樣步聚，即加標本，加酶聯(lián)系物，加底物。加樣時應將所加物加在ELISA試劑盒板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留意不行濺起，不行產(chǎn)生氣泡。加標本通常用微量加樣器，按規(guī)則的量參加板孔中。每次加標本應更換吸嘴，避免發(fā)作交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。試劑盒的選擇：

　　◎試劑應從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。

　　◎特異性：常用交叉反應率表示。含有與待測物相近結(jié)構部份的物質(zhì)可能存在交叉反應，使測定結(jié)果升高，可能導致假陽性，所以交叉反應是評價其質(zhì)量的關鍵指標。

　　◎精密度：ELISA試劑一般指其批內(nèi)CV%，其值應小于15%；定量試劑應同時考察線性范圍。

　　◎準確度：通過添加回收實驗進行評價。

　　PCR試劑盒操作時注意事項：

　　1.不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同，務必按照所用AChRab試劑盒廠家供應/量大從優(yōu)嚴格操作，否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.

　　2.若不同批號ELISA試劑盒的不同組分(A液或酶工作液)，或不同試劑的不同組分進行交叉使用，有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高，花板等情形。

　　3.反應時間的誤差，做大量標本時，孔和后一孔以及一些特殊標本可能影響較大。

　　4.臨界值附近標本波動為正?，F(xiàn)象，任何試劑均不可避免?？梢钥紤]將標本做奇數(shù)次復檢。

　　5.加樣時樣品量誤差，對于陰或很陽的標本影響不大，但對閾值附近的標本影響較大，建議校對加樣器。