亚洲欧美日本A∨在线观看,色多多,欧美韩日本一本交道免费,肥大BBWBBW高潮喷水

您好,歡迎進入上海莼試生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
全國服務(wù)熱線:13585831301
上海莼試生物技術(shù)有限公司
您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒反應(yīng)五要素

腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒反應(yīng)五要素

瀏覽次數(shù):216發(fā)布日期:2025-03-12

腺病毒D型探針法熒光定量PCR試劑盒反應(yīng)五要素

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


Contact Us
  • 聯(lián)系QQ:3004972506
  • 聯(lián)系郵箱:sdfskdfhs3004972506@qq.com
  • 傳真:86-021-60443211
  • 聯(lián)系地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661

掃一掃  微信咨詢

©2025 上海莼試生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有  備案號:滬ICP備17029297號-3  技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    GoogleSitemap    總訪問量:123689 管理登陸

常州市| 辽源市| 合作市| 新邵县| 商河县| 伊宁县| 文山县| 张家港市| 历史| 华容县| 安平县| 瓮安县| 五河县| 西安市| 呼玛县| 新泰市| 深泽县| 杭州市| 宜城市| 雅江县| 沙坪坝区| 潞西市| 轮台县| 永宁县| 西宁市| 陇川县| 凤山市| 卢龙县| 秦安县| 兴宁市| 象州县| 霍林郭勒市| 文化| 龙里县| 保康县| 屯留县| 保靖县| 伊通| 霞浦县| 彭山县| 平安县|